Komplet ELISA za protitelesa proti cikličnemu citruliniranemu peptidu (CCP)

Ta komplet zazna protitelesa proti cikličnim citruliniranim peptidom (protitelesa CCP) v vzorcih človeškega seruma na podlagi posredne metode, pri čemer se kot premazni antigen uporabljajo prečiščeni antigeni cikličnih citruliniranih peptidov.

Postopek testiranja se začne z dodajanjem vzorca seruma v reakcijske vdolbinice, ki so bile predhodno prevlečene z zgoraj omenjenimi prečiščenimi antigeni, čemur sledi inkubacijska doba. Če so v vzorcu prisotna protitelesa CCP, bodo med to inkubacijo ta specifično prepoznala in se vezala na ciklične citrulinirane peptidne antigene, prevlečene na mikrovdolbinicah, s čimer bodo tvorili stabilne komplekse antigen-protitelo. Za zagotovitev natančnosti nadaljnjih korakov se nevezane komponente v reakcijskih vdolbinicah odstranijo s postopkom izpiranja, kar pomaga odpraviti morebitne motnje zaradi drugih snovi v serumu.

Nato se v reakcijske vdolbinice dodajo encimski konjugati. Po drugi inkubaciji se ti encimski konjugati specifično vežejo na obstoječe komplekse antigen-protitelo in tvorijo večji imunski kompleks, ki vključuje antigen, protitelo in encimski konjugat. Ko se raztopina substrata TMB vnese v sistem, encim v konjugatu katalizira kemijsko reakcijo s substratom TMB, kar povzroči vidno spremembo barve. Intenzivnost te barvne reakcije je neposredno povezana s količino protiteles CCP, prisotnih v prvotnem vzorcu seruma. Nazadnje se za merjenje absorbance (vrednost A) reakcijske mešanice uporabi čitalnik mikroplošč. Z analizo te vrednosti absorbance je mogoče natančno določiti raven protiteles CCP v vzorcu, kar zagotavlja zanesljivo osnovo za ustrezno klinično testiranje in diagnozo.